基于TurboID鄰近蛋白標記技術鑒定細胞內Smad3相互作用網絡

摘要： 目的 利用生物素標記酶TurboID介導的鄰近標記技術,篩選并構建轉錄因子Smad3的活性調控網絡。方法 構建一個含有Smad3和TurboID基因序列的誘導型表達質粒,并通過慢病毒介導的轉染方法將其導入Smad3敲除的腎小管上皮細胞TCMK1中,形成過表達的穩定轉染細胞系。在建立穩定轉染細胞系的基礎上,首先確定了適合的生物素標記濃度和時間,隨后進行了生物素標記實驗。通過鏈霉親... ... （共5頁）