在細胞中有許多種還原成分(如谷氨酰胺)可防止蛋白質氧化,但是一旦細胞破碎,由于和氧的接觸以及稀釋作用而引起抗氧化成分的減少,使許多蛋白質被氧化而失去活性。氧化作用可在蛋白質的若干位點上發生,盡管有時可通過減少巰...[繼續閱讀]

    膜蛋白的提取是蛋白質提取的一個特例。在膜蛋白的提取和純化過程中常會用到去垢劑,在去垢劑的幫助下使膜蛋白溶解。去垢劑是一種一端親水一端疏水的兩性雙極性小分子,可在水中溶解。除了膽酸鹽以外,去垢劑分子通常是由線...[繼續閱讀]

    在提取、純化蛋白質時,其效果常常受到本身存在的水解酶的影響。在提取蛋白質的同時破碎的細胞可釋放出蛋白酶,這些酶在與欲提取的蛋白質接觸時,一旦條件適宜,就會發生反應,導致蛋白質分解,使實驗失敗。因此,在蛋白質提取過...[繼續閱讀]

    (一)原料的選擇蛋白質在分離純化過程中,能否成功提取其有效成分與原材料的選用有密切關系。原料的選擇主要依據所提取的目標蛋白質和實驗目的而定。從工業生產角度考慮,理想的原料應含量高、來源豐富、穩定性好、成本低、...[繼續閱讀]

    在蛋白質的提取分離過程中,常常遇到目標蛋白質存在于細胞內的情況,需要破碎細胞。事實上,除了提取細胞外成分,對細胞內及多細胞生物組織中蛋白質的分離提取均需先將細胞破碎,使其充分釋放到溶液中。不同的生物體或同一生物...[繼續閱讀]

    制備某種生物大分子時,往往需要采用細胞中某一部分為材料;或者為了純化某一特定細胞器上的生物大分子,通常破碎細胞后,先分離各組分,以防干擾,這對制備一些高難度和高純度的生物大分子是必要的。細胞器的分離一般采用差速...[繼續閱讀]

    影響蛋白質水解變性的因素有外在因素和內在因素兩方面,外在影響因素主要包括細胞破碎方式、緩沖液pH、溫度、離子強度、還原劑和金屬離子等;而內在影響因素主要是蛋白水解酶的問題,提取過程中要注意采取一定的保護措施。一...[繼續閱讀]

    (一)蛋白質提取液的濃縮濃縮是低濃度的溶液除去水或溶劑變為高濃度的溶液的過程。蛋白質產品制備工藝中往往在提取后和結晶前進行濃縮。加熱和減壓蒸發是最常用的方法,一些分離提純方法也能起濃縮作用。例如,離子交換法與...[繼續閱讀]

    動物材料中的蛋白質有些是以可溶的形式存在于體液(如血漿)中,這些蛋白質可以不必經過提取直接進行分離;而有些像角蛋白、膠原蛋白等一些不溶性蛋白,必須先除去一些與實驗無關的結締組織、脂肪組織,再用適當的方法提取后才...[繼續閱讀]

    植物組織中包含有多種蛋白質,它們在性質上存在著巨大的差異,并且需要特殊的條件才能進行提取和純化。因此,用單一的提取方案應用于所有植物蛋白質的提取是行不通的。在初始階段就必須考慮提取比例和可能使用到的相應型號...[繼續閱讀]