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蛋白質純化與分析 共有 141 個詞條內容

一、蛋白質及其性質

    蛋白質是由氨基酸組成的一類高分子有機化合物,是人體的必需營養素。蛋白質的英文是protein,源于希臘文的proteios,是“頭等重要”意思,表明蛋白質是生命活動中頭等重要的物質。蛋白質是細胞組分中含量最為豐富、功能最多的高分...[繼續閱讀]

蛋白質純化與分析

二、蛋白質純化的意義

    蛋白質是生命活動的物質基礎,也是生物體內的功能性大分子。隨著分子生物學、結構生物學、基因組學等研究的不斷深入,人們意識到僅靠基因組的序列分析來闡明生命活動的現象和本質是遠遠不夠的,只有從蛋白質組學的角度來研...[繼續閱讀]

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三、蛋白質純化的依據

    能從成千上萬種蛋白質混合物中純化出一種蛋白質的原因,是不同的蛋白質在物理、化學和生物學性質方面有著極大的不同,這些性質是由蛋白質氨基酸的排列序列和數目不同造成的。連接在多肽主鏈上的氨基酸殘基可以是帶正電荷或...[繼續閱讀]

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四、蛋白質純化的一般程序

    按照蛋白質分離純化的依據,蛋白質的純化方法可按照分子大小、形狀、帶電性質及溶解度等主要因素進行分類。按分子大小和形態分為差速離心、超濾、分子篩及透析等方法;按溶解度分為鹽析、溶劑抽提、分配層析、逆流分配及結...[繼續閱讀]

蛋白質純化與分析

五、蛋白質純化方案的設計與評價

    蛋白質純化的總目標是設法增加蛋白質樣品的純度或比活力,對純化的要求是以合理的效率、速度、收率和純度,將需要的蛋白質從細胞的全部其他成分,特別是不想要的雜蛋白中分離出來,同時仍保留它該有的生物學活性和化學完整性...[繼續閱讀]

蛋白質純化與分析

第一節 概述

    蛋白質是一種極具多相性的生物大分子,離開其天然環境,蛋白質分子極不穩定,容易變性,另外,在細胞和提取液中蛋白質的性狀也不盡相同。從正常生物基質中提取各種蛋白質均需要有特定的條件。如果不能滿足這一條件,蛋白質將很...[繼續閱讀]

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一、緩沖液

    能抵御少量的酸、堿,或稀釋少量倍數時,體系的pH基本不變的溶液稱為緩沖溶液。緩沖溶液的緩沖對一般是由共軛酸堿對或兩性物質組成。緩沖液可以抗衡蛋白質溶液中pH的改變,選擇合適的緩沖液對于維持一定pH下蛋白質的穩定及保...[繼續閱讀]

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二、溫度

    不同的蛋白質在不同的溫度下具有不同的溶解度和活性。大多數蛋白質在低溫(如0℃左右)下比較穩定,故分離操作一般在0℃或更低溫度下進行。例如,在生產人絨毛膜促性腺激素(HCG,一種糖蛋白)制品時,一定要在低溫下進行。當溫度低...[繼續閱讀]

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三、溶液極性和離子強度

    在蛋白質提取液中通常包含0.1~0.2mol/L的KCl或NaCl來模擬生理狀況下的離子強度。一般來說,離子強度較低的中性鹽溶液有促進蛋白質溶解、保護蛋白質活性的作用,離子強度過高則會引起蛋白質發生鹽析作用。但是,蛋白質的性質各不...[繼續閱讀]

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四、金屬離子

    溶液中的金屬離子影響所提取蛋白質的活性和穩定性。如果蛋白質的活性或穩定性需要金屬離子來維持,這時應當注意緩沖液對金屬離子的親和性,避免使用Tris緩沖液作為提取液。在100mmol/LTris緩沖液中加入2mmol/LMn2+則29%的金屬離子被...[繼續閱讀]

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